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lipofectamine3000 说明书


lipofectamine3000 protocol 中文版
1.接种细胞至 70-90%汇合度时转染 2.使用 Opti-MEM 培养基稀释 Lipofectamine?3000 试剂(2 管),充分混匀 3. 使用 Opti-MEM 培养基稀释 DNA,制备 DNA 预混液,然后添加 P3000?试 剂,充分混匀。 4. 在每管已稀释的 Lipofectamine?

3000 试剂中加入稀释的 DNA (1:1 比例)。 5. 室温孵育 5 分钟。 6. 加入 DNA-脂质体复合物至细胞中。 7. 37℃孵育细胞 2 - 4 天。然后分析转染细胞。 siRNA 转染
转染 siRNA 至细胞中时,遵循如上所述的 DNA 实验方案,但在稀释 siRNA 时不要 加入 P3000?试剂(第 3 步)。 表 1:使用 lipofectamine?3000 转染 DNA 产品参考用量 细胞培养容器 贴壁细胞 Opti-MEM 培 养 基 稀 释 Lipofectamine?3000 试剂 (2 管) Opti-MEM 培 养 基 稀 释 DNA, 制备 DNA 预混液, 然后添加 P3000?试剂, 充分混匀 Lipofectamine?3000 试剂 中加入稀释的 DNA (1:1 比例) Opti-MEM 培养基 Lipofectamine 3000 Opti-MEM 培养基 DNA (0.5–5 μg/μL) P3000? 试剂(2 μL/μg DNA) 稀释的 DNA 稀释的 Lipofectamine? 3000
?

96-well

24-well
4

6-well
5

1–4 × 10 5 μL × 2

0.5–2 × 10 25 μL × 2

0.25–1 × 106 125 μL × 2

0.15 和 0.3 μL 0.75 和 1.5 μL 3.75 和 7.5 μL 10 μL 0.2 μg 0.4 μL 5 μL 5 μL 50 μL 1 μg 2 μL 25 μL 25 μL 250 μL 5 μg 10 μL 125 μL 125 μL

室温孵育 5 分钟 加入 DNA-脂质体复合物 至细胞中
96-well 24-well 6-well

DNA-脂质体复合物

10 μL

50 μL

250 μ L

37° C 孵育细胞 2–4 天。然后分析转染细胞。


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