当前位置:首页 >> 基础医学 >>

尿11项检测干化学测定的原理


干化学测定的原理 干化学法尿 pH 检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试膜块区 含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)。两种酸碱指示剂 适量配合可反映尿 pH4.5~9.0 的变异范围。 二、干化学法检查尿 pH 的注意事项 (1)检测时尿标本必须新鲜,放置过久细菌分解尿液成分可导致 pH 改变,大多数细菌如变形‘ 等,分解尿素产生氨,可使尿液呈碱性

;但在少数情况下,细菌也分 解尿液成分产生酸性物质,使尿 q 偏酸。 (2)当肾脏分泌的尿液含有过多的碳酸氢盐和碳酸缓冲对时,如果 尿液放置时间过久,尿液中?氧化碳会自然扩散到空气中,使尿 pH 增高。 3)在测定过程中, 应严格按规定的时间将试剂带浸泡尿液标本中, 浸尿时间过长,尿 pH 呈减低 4)在使用多项试剂带进行测定时,要认真阅读使用说明,严格按 说明书进行操作,试剂带上不能浸量的尿液标本,防止试剂带相互之 间的“溢出"(runover)现象,影响尿 pH 测定。 5)尿液 pH 主要反映肾脏在维持血浆和细胞外液正常氢离子浓度 方面的能力,而干化学法测定只 4\半定量的实验结果。因此在临床 观察结果时,不要单从尿 pH 测定值分析,要结合临床其他资料驻数 据,综合分析才能得出正确的判断。

方法原理:干化学法尿 pH 检查的原理是采用酸碱指示剂法,其测试 膜块区含有甲基红(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚蓝(pH6.0~7.6)。 两种酸碱 指示剂适量配合可反映尿 pH4.5~9.0 的变异范围。 临床意义: 1、尿 pH 检测了解体内酸碱平衡情况 在代谢性酸中毒、痛风、糖尿病、肾结石、Ⅳ型肾小管酸中毒、 白血病和坏血病时,常有强酸性尿。碱中毒及原发性醛固酮增多症、 肾小管酸中毒(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型)、泌尿系变形杆菌感染时,可呈碱性尿。 2、观察尿 pH 变化,指导临床用药,预防肾结石的形成和复发,减 轻泌尿系微生物的感染 研究证明, 某些肾结石的形成与尿 pH 变化密切相关, 如在尿 pH 降低时容易形成酸性结石;而在尿 PH 增加时容易形成碱性结石。因 此,临床对于某些患者有形成酸性结石(如尿酸和胱氨酸结石)倾向 S 时如果给药使尿 pH 保持碱性或至少尿 pH 在 6.5 以上,就不会形成 酸性结石。相反,临床对于某些患者有形成碱性结石(如磷酸钙结石) 倾向时,如果给药使尿 pH 保持酸性,也就不会形成碱性结石。此外, 碱性尿可促进某些微生物的生长发育, 同样使尿液呈酸性也可预防细 菌的生长,减少泌尿系统的感染。 尿 pH 检测不仅可了解体内酸碱平衡情况, 还可监控尿 pH 变化对 其他膜块区反应的干扰作用,如尿蛋白测定、尿比重检查受尿 pH 影 响很大,因此,当尿 pH 明显升高或减低时,要考虑同时检测尿比重、 尿蛋白结果:是否可靠或用其他方法进行检测。 。

第二节

尿比重(比密)测定

尿液比重(比密)(specificgravity,SG)是指尿液与纯水的重量之 比,是尿中溶解物质浓度的指标。溶解于尿液中的固体物质,主要是 尿素和氯化钠,前者反映食物中的蛋白质含量,后者反映食物中的含 盐量,在正常生理情况下,尿比重与排出的水分、盐类和尿量有关。 尿比重测定可以估计肾脏浓缩功能。由于尿比重还受年龄、饮水 量、出汗等因素的影响,故多次测定比单次测定更能反映肾脏浓缩功 能。 尿比重测定在临床使用的方法较多,如称重法、浮标法(尿比重计 法)、液滴落下法、超声波法、折射仪法,于化学试剂带法,等等。 由于干化学试剂带法具有简便、快速,测定尿比重不受非离子成分如 葡萄扰,且同时给出多项尿液参数结果,现已广泛使用。但由于试验 结果划分范围跨度大, 敏感性较比学法测比重只能用于健康人及初诊 病人筛选试验。根据美国 NCCLS 文件,折射仪法为尿比重检测的参 考方法。 一、干化学法测试的原理 。

干化学试剂带法测定尿比重的膜块中主要含有两种成分(表 3— 2) : 一 种 是 电 解 质 共 聚 体 , 即 甲 氧 乙 面 丁 烯 二 酸 (methoxyethylenemaleic acid)共聚合体(图 3—1); 另一种是酸碱指示剂 溴麝香草酚蓝(PH6.o~7.6)。除这两种物质外,还含有其他物质如 缓冲剂等。其测试原理模式见图 3—2。

二、干化学法尿比重检查注意事项 (1)尿液标本必须新鲜,不能含有强碱、强酸等物质(如奎宁、嘧啶等 药物),这些物质的存在都会直接影响试剂带测定尿比重。当尿液 pH ≥7.0 时,应该在干化学法测定结果的基础上增加 0.005 作为由强 碱尿损失的补偿。其补偿机理是:当尿液 pH≥7.o 时,尿液必将存 在着氢氧根离子(OH—), 它的存在会中和掉由尿液离子成分使电解质 聚合体释放出来的氢离子(H’),导致氢离子不与酸碱指示剂反应, 结果偏低。在强酸性尿液时,干化学法测定尿比重结果明显偏高,但 在一般情况下尿液不可能呈强酸性,所以影响不如碱性尿那么直接。 表 3—3 显示不同尿 pH 对尿比重的影响。 (2)尿比重计法、折射仪法和干化学法是采用不同的原理测定尿液比 重, 测定的结果必将有一定的定鲍差距, 如尿液中非离子型化合物(如 葡萄糖、造影剂等),可导致比重计和折射法测定结果偏 (3)尿蛋白浓度增高时,由于蛋白分子本身是两性电解质,即本身既 有电荷又有固体量,所以对三下按都有影响,以干化学法最为明显, 折射仪法次之, 比重计法影响最小。 。 教科书规定, 每增加 log/L 质, 折射仪法应在原测定值的基础上减去 o.005,比重计法碎去 0.003。 尿蛋白干扰干化学法测定原指示剂呈现颜色而使结果偏高。表 3—5 显示不同浓度尿蛋白对尿比重的影响。 (4)干化学法不宜用于新生儿尿比重检查,这可能是由于新生儿尿比 重太低,仅在 1.002~004 之间的缘故。 (5)由于干化学法所测尿比重结果间隔较大,不能反映较小的比重变

化,因此只能用于过高或过低汞比重病人的筛选,对于病理性特别是 系统观察的病例仍以折射仪法更为理想。 NCCLS 建议以折射仪法作为干化学法测定尿比重的参比方法, 浮标法(比重计法)测定尿比重不再使用。折射仪法可用去离子水或蒸 馏水和已知浓度溶液监测其测量结果是否准确,如蒸馏水比重应为 000;0.513mol 儿氯化钠溶液,比重应为 1.015;0.856mol 儿氯 化钠溶液,比重应为 1.022';263mol 儿蔗糖溶液,比重应为 1.034。

三、尿比重检查的临床意义
尿比重的参考值在 1.015—1.025 之间,早晨第一次尿标本的 比重最高,通常>1.020;在多次随机尿标本中,尿比重在 1.025 以上,提示肾浓缩功能正常。 (1)尿比重的高低主要取决于肾脏的浓缩功能,它与尿内所含溶质 的多少成正比,而与尿量成反比,并与尿液的颜色深浅平行。 ①尿比重增高:表示尿液浓缩,见于急性肾炎、蛋白尿、糖尿病、 高热、大量出汗、脱水、心功能不全、流行性出血热少尿期等。 ②尿比重减低:表示肾脏浓缩机能减退,见于尿崩症、慢性肾炎、 精神性多饮多尿症、原发性醛固酮增多症、流行性出血热多尿期及恢 复期。 ③尿比重比较固定:尿比重变化不大,一般固定在 1.010 左右, 呈等张尿,表示肾实质有严重损害。 (2)用尿比重和尿量的动态变化来监测肾结石病人的尿物理变化,

可用于指导病人饮食习惯,预防病人结石的再次形成。 (3)尿比重的高低不仅直接反映肾脏浓缩功能,而且还能监测全自 动尿沉渣分析仪对红细胞形态析是否受尿比重的影响(尿比重偏低, 可使红细胞形态由均一性向多形性转变)。

第三节尿蛋白测定 一. 测定原理 尿液蛋白质的测定方法采用的是指示剂蛋白质误差法, 即在一定 的条件下(PH 为3.2时) ,溴酚蓝产生出阴离子,与带阳离子的蛋 白质(主要是白蛋白)结合发生颜色变化。 二、干化学法测定尿蛋白的注意事项 干化学法测定尿蛋白操作简单快速、敏感性高,但该法是利用 尿蛋白与某些染料相结合而产生的歹色变化来测定蛋白含量, 因此在 使用中,无论用哪一种方法进行尿蛋白定性检查,都必须重视下列问 题。 (一)尿液 pH 尿液标本必须新鲜,变质的尿液会使尿 pH 发生变化,或者尿 液本身过酸、过碱都会影响实验结吴当病人服用奎宁、奎宁丁和嘧啶 等药物时,引起尿液呈强碱尿(pH≥9.o),超过了试剂带本身的缓冲 耄力,会使干化学法出现假阳性结果;而用磺基水杨酸法和加热乙酸 法作尿蛋白定性时,因尿液过碱,远熏蛋白质的等电点出现假阴性结 果。鉴别方法是用稀醋酸将尿液 pH 调至 5~6 后再进行实验,借以

区爷是否由于强碱尿而导致干化学法的假阳性, 或磺基水杨酸法和加 热乙酸法的假阴性。同样,当尿滞 pH<3.0 时,也会引起尿蛋白定 性试验的假阴性。表 3—8 显示不同 pH 值对尿蛋白测定结果的影响。

(二)尿液所含蛋白成分 不同的尿蛋白测定方法对病人尿液内不同类型蛋白质检测的 敏感性不同,测定结果也不相同:三擞娟教授等经实验证实,尿中球 蛋白浓度为 4000mg 儿以下时,干化学法蛋白定性为阴性,只有当其 芝譬达 5 500mg/L 时,才出现可疑反应;白、球蛋白比值为 1:2 的蛋白尿,蛋白浓度高达 2000mg 儿芝·会出现阳性(+)反应,干化学 法测量球蛋白的敏感性仅为白蛋白的 1/100~1/50。磺基水杨酸定 性三卅球蛋白反应的灵敏度亦较白蛋白低,浓度同时为 2 000mg 几 时,白蛋白出现阳性(++)反应,球蛋三, :勺囚性(+)反应;在白、球 蛋白尿中,球蛋白比例增大,则阳性程度减弱。加热乙酸定性法和双 缩脲定量三可以对白蛋白、球蛋白显示同样的敏感性,表 3—9 显示 同一份标本不同测定方法测定尿蛋白的差异程蔓: 加热乙酸法对于单 纯球蛋白尿具有特殊反应,即浓度从 500mg 儿到 5 500mg 儿浓度的 尿液,此法车表现为大小不等的凝块状而尿液本底并不显现明显混 浊,从而提示本法可能为高度非选择性蛋白尿 F: :筛试验。因此在 进行肾病患者尿蛋白测定时, 特别是在疾病发展过程中需要系统观察 尿蛋白含量的振例,最好使用磺基水杨酸法(或加热乙酸法)和双缩脲 法进行定性、定量实验。 标本编号干化学法(mg 儿)双缩脲法(mg 儿)

(三)尿液中的干扰物 研究证明,多种物质(多为药物)可使尿蛋白不同检查方法呈现出 假阳性和假阴性结果。丛玉隆等曾凝;了了多种抗生素对尿蛋白测定 影响的研究,发现青霉素族药物对其有明显的干扰作用。为了证明这 一笔者对大剂量青霉素静脉注射患者用药前后进行了尿蛋白的检测, 结果表明:①尿液内青霉素浓度罐:立 4 万 U/ml 时,对干化学法 测定尿蛋白产生假阴性,而对磺基水杨酸法测定尿蛋白产生假阳性 (表)。②静脉滴注青霉素 240 万 U 组 2h 内,320 万 U 组 3h 内,480 万 U 组 5h 内,尿中青霉素浓度可达到影响尿蛋白测定水平(表 3—11 和表 3—12), 可对磺基水杨酸法产生假阳性, 对干化学法产生假阴 因 此,对于含蛋白尿的患者使用青霉素治疗时,使用不同的测定尿蛋白 方法需要考虑不同的干扰作主. 即磺基水杨酸法使结果增强或出现假 阳性,干化学法测试使结果偏低甚至出现假阴性。除此之外,尿等有 高浓度有机碘造影剂(如胆影葡胺、泛影葡胺、碘番酸)及尿酸盐时, 磺基水杨酸法可呈假阳性,而化学法和加热乙酸法影响较小。 (四) 。尿液存放时间及污染 尿液存放时间过久而致细菌生长繁殖, 或尿液受其他分泌物如阴道分 泌物污染,或含有较多细胞成屡渣试剂带测试原理及注意事项分时, 也可出现阳性反应。但这种蛋白尿绝非泌尿系统病变所致。

四、尿蛋白测定的临床意义

(一)参考范围 尿蛋白定性试验一般为阴性。 (二)生理性蛋白尿或无症状性蛋白尿 生理性蛋白尿,指泌尿系统并无器质性病变,而是由于各种体内 环境因素只怔常机体的影响所导 2 的尿蛋白含量增多, 可分为功能性 蛋白尿和体位性(直立性)蛋白尿。 1.功能性蛋白尿 功能性蛋白尿是指机体剧烈运动、发热、低温刺激、精神紧张、 交感神经兴奋等所致的,暂时性、轻度白尿。其形成机理可能是由于 上述诸因素使肾血管痉挛或充血, 导致肾小球毛细血管壁的通透性增 一旦诱发因素消失,尿蛋白也迅速消失,此类蛋白尿定性试验一般不 超过阳性(牛),定量试验.5g/24h 尿,多见于青少年。 2.体位性蛋白尿 体位性蛋白尿又称直立性蛋白尿,是指由于直立位或腰部前突时 引起的轻度或中度蛋白尿。其特点 ZI 司尿蛋白定性为阴性,起床活 动若干时间后出现蛋白尿,再平卧后又转为阴性。常发生于青少年, 一直年龄增长而消失。此种蛋白尿的发生机理尚不完全明了,可能与 直立时前突的脊柱压迫肾静脉;直才由于肾向下移动,肾静脉被动扭 曲,而使肾脏处于暂时瘀血状态,与淋巴血流受阻有关。此类蛋白尿 £试验阳性可达什,甚至卅,但卧床休息后可消夫。

(三)病理性蛋白尿

病理性蛋白尿指泌尿系统因器质性病变, 尿内持续出现蛋白而盲。 导致蛋臼尿的原因很多,通常可刁为以下 5 种。 1.肾小球性蛋白尿 肾小球性蛋白尿是由于肾小球滤过膜受损而使通透性增加,滤出 较多的血浆蛋白,超过了肾小管重工能力。此型蛋白尿最为常见,蛋 白尿以白蛋白为主,也含有一些分子量较大的球蛋白,分子量 4 万以 吁蛋白质含量极少。 2.肾小管性蛋白尿 肾小管性蛋白尿是由于炎症或中毒引起近曲小管对低分子量蛋白 质的重吸收障碍而导致的以低分曼蛋白质为主的蛋白尿。 此类的特点 是以 p:微球蛋白、溶菌酶等增多为主,白蛋白正常或轻度增多。 3.混合性蛋白尿 混合性蛋白尿是由于肾病同时累及肾小球和肾小管而产生的蛋白 尿。此类特点是白蛋白和 pz 微球三司时增多。 4.溢出性蛋白尿 溢出性蛋白尿主要是血循环中出现低分子量蛋白质(如游离血红 蛋白、肌红蛋白)或本—周氏蛋白过寄小球滤过及肾小管重吸收功能 均正常而溢出尿液中。此类主要见于骨髓瘤、骨骼肌严重创伤及大叽 梗塞等。 5.组织性蛋白尿 组织性蛋白尿是指在尿液形成过程中,肾小管代谢产生的和肾组 织破坏分解的蛋白质,以及炎症或严刮激泌尿系统分泌的蛋白(如

Tatum—Horsfall 糖蛋白等)。 上述蛋白尿可分为肾前性、肾性及肾后性蛋白尿。本—周蛋白 尿、血红蛋白尿、肌红蛋白尿、溶菌酶尿篱哥前性蛋白尿。肾性蛋白 尿见于肾小球或肾小管疾病,可因炎症、血管病(高血压病)、中毒(药 物、重曝车)等原因引起。肾后性蛋白尿则见于肾盂、输尿管、膀胱、 尿道的炎症、肿瘤、结石。动态观察尿蛋寻,对上述疾病的诊断、病 情观察、判断疗效和及时了解是否出现药物副作用等均有一定意义。

(四)蛋白尿的分类 至白尿可按尿中蛋白含量的多少分为轻、中、重三类。①轻度 蛋白尿:尿蛋白含量<0.5g/24h,可见苷. ,管及肾小球病变的非活 动期、 肾盂肾炎、 体位性蛋白尿等; ②中度蛋白尿: 尿蛋白含量在 o. 5~ 4;乙除肾炎外,见于高血压肾动脉硬化、多发性骨髓瘤等;⑧重度 蛋白尿: 尿蛋白>4g/24h, 可见于噔兰肾小球肾炎及红斑狼疮性肾炎、 肾病综合征等。以上分类是相对的,当病变同时累及肾小球及肾亏; 乙低分子量、高分子量蛋白质均增多,此时动态观察 24h 尿蛋白量有 助病程观察及疗效判断。 (五)蛋白尿的选择性 叫。 Blainly 等首先提出了蛋白尿选择性的概念作为判断肾小球 年 损伤严重程度的指标。 选择性学法测定尿中的中分子量蛋白质和高分 子量蛋白质的比值来确定的。有关选择性蛋白尿、非选择性蛋白尿及 选择性蛋白尿指数(SPl)将在以下章节介绍。

第四节 尿糖测定 严格地说,尿糖测定应该是尿葡萄糖测定。正常人尿内可有 微量葡萄糖,尿内含糖量为 o.56~5mmol/24h,定性试验为阴性。 尿糖定性试验常用班氏法、葡萄糖氧化酶法和干化学法。 一、干化学法测试的原理 干化学试剂带法测定尿糖的膜块中主要含有葡萄糖氧化酶、 过氧化物酶和色源及其他物质。不同家采用色源有异(表 3—13),主 要有两类:①采用碘化钾作色源(如美国 Ames 公司的 Clinitek“200 型.②采用联甲苯胺作色源(如德国宝灵曼公司的 MiditronR 型)。测 定尿糖的原理是:膜块内葡萄糖氧化酶(GOD)作用于尿液中葡萄糖, 使其形成葡萄糖醛酸和过氧化氢(H20:),后者再被过氧化氢酶(POD) 售化释放出[O],后者使色源呈现不同的颜色变化。 三、尿糖测定的临床意义 尿糖一般是指尿液中葡萄糖而言,其来源于血液中的葡萄糖。正 常人肾脏的肾糖阈值是 90~180mg/d1)。一般情况下血糖浓度相对 比较恒定,空腹血糖为 4.44~6.66mmol/L,进食必一 9.99mmo] 儿,由肾小球滤过的葡萄糖几乎全部可被肾小管重吸收,只有极微量 部分由尿北为 0.56~1.67mmol,浓度为 0.28—0.83mmol/L, 用任何常规性检查均不能测出。葡萄糖是否会出现于尿中,一是要看 血糖浓度,二是要看肾小管重吸收的能力,即肾糖阈值。 尿中是否出现葡萄糖取决于三个因素:C 动脉血液由葡萄糖浓

度;②每分钟流经肾小球的血浆量;③近端肾小管上皮细胞重吸收葡 萄糖的能力,即肾糖团:弩糖团可随肾小球滤过率和肾小管葡萄糖重 吸收率的变化而变化。当肾小球滤过率减低时,可导致·肾糖阔·提 高;而肾小管重吸收率减少时,则可引起肾糖阈降低。葡萄糖尿除可 因血糖浓度过高引起外,也可因肾小管重吸收能力降低引起,后者血 糖可正常。

(一)生理性糖尿 生理性糖尿为一过性糖尿,是暂时性的,排除生理因素后恢复正 常。 1.饮食性糖尿 短时间内食用大量糖所致,糖的同化存在着个体差异,但健 康人一次进食葡萄糖 200g 以上即可产生糖尿。 2.应急性糖尿 又称一过性糖尿。原因是颅脑外伤、脑血管意外、情绪激动等 情况下, 延脑血糖中枢受刺激, 导致肾上腺素、 胰高血糖素大量释放, 因而可出现暂时性高血糖和糖尿。 3.妊娠性糖尿 以妊娠中末期多见,由于肾小球滤过增加,肾小管的重吸收相 对减少;另外,妊娠末期和哺乳期间可因乳腺产生乳糖过多而至乳糖 尿。 ,

(二)病理性糖尿 1.真性糖尿 真性糖尿是由于胰岛素绝对或相对不足,血糖浓度超过肾糖阈 值而从尿中排出所致。尿糖检查不仅是诊断糖尿病的重要依据,也是 指导临床医生胰岛素使用量的依据之一,判断疗效的主要指标之一。 但如果并发肾小球硬化症,则肾小球滤过减少,肾糖阈升高,此时血 糖虽已超过÷般的肾糖阈值,尿糖却表现为阴性。但于进食后 2h 由 于负载增加,则可见血糖升高,尿糖阳性。对于此类糖尿病患者,不 但需同时做空腹血糖、尿糖检查,进食后 2h 尿糖检查,还需进一步 做糖耐量试验等检查,以明确诊断。 2.肾性糖尿 · 。

肾性糖尿是由于肾小管对葡萄糖的重吸收功能减退,肾糖阈 降低而引起的糖尿。如家族性糖尿(先天性近曲小管重吸收功能缺 陷),无明显症状。新生儿糖尿是因近曲小管功能尚未完善。以上均 应与真性糖尿病相区别, 其鉴别要点为肾性糖尿时空腹血糖及糖耐量 试验结果均正常。 3.其他糖尿 生长激素、甲状腺素、肾上腺素、皮质醇、胰高血糖素都可 使血糖浓度上升而引起糖尿。 ①甲状腺功能亢进, 甲状腺素分泌过多, 使消化道肠壁的血流加速和糖的吸收增快,因而在饭后血糖增高,出 现糖尿;②肢端肥大症,可因生长激素分泌旺盛而致血糖升高,出现 糖尿;⑧嗜铬细胞瘤,可因肾上腺素和去肾上腺素大量分泌,致使磷

酸化酶活性增强,促使肝糖原降解为葡萄糖,引起血糖升高而出现糖 尿; ④兴氏(Cushing)综合征, 可因皮质醇分泌增多, 使糖原异生旺盛, 抑制己糖激酶和对胰岛素作用,因而二理糖尿。此外,肝功能障碍时 血糖升高也可见糖尿。

第五节 尿酮体的测定 。 一、千化学法测定的原理

二、千化学法测定尿酮体的注意事项 (1)由于尿酮体中的丙酮和乙酰乙酸都具有挥发性,乙酰乙酸 更易受热分解成丙酮,尿液被细菌污诞亏,酮体消失。因此,尿液必 须新鲜,及时送检,以免因酮体的挥发或分解,出现假阴性结果或偏 低筹吴: (2)干化学法对乙酰乙酸的敏感性为 50~100mg/L,对丙酮的 敏感性为 400—700mg/L,不与 p—羟三鬟发生作用。但各大厂家生 产的试剂带存在差异,对酮体测定成分不同,应加以注意。注意干化 学法与酮体粉法的敏感度差异,同一病理标本,两种方法可能出现截 然不同的结果,分析结果时应特别注意。

(3)不同病程酮体成分的变化会给检测结果带来差异。不同病因引 起的酮症其酮体的成分可不同,即使同一病人在不同病程也可有差 异。在糖尿病酮症酸中毒早期,酮体的主要成分是伊羟丁酸,乙酰乙 酸很少或缺乏,此时测量可导致对总酮体量估计不足;在糖尿病酮症 酸中毒症状缓解之后,乙酰乙酸含量反而比急性期初始含量高。因此 检验人员必须注意病程发展,与临床医生共同分析实验结果的可靠 性,这就是分析后质控的重要内容。 三、尿酮体测定的临床意义 正常情况下,由肝脏产生的酮体经血液运送到其他组织,氧 化成二氧化碳和水并产生能量。当糖代谢发生障碍时,脂肪的分解代 谢增多,这时肝内酮体产生的速度超过肝外组织利用的速度,血中酮 体增加,称酮血症;过多的酮体从尿排出,称酮尿,可大概分为以下 4 种情况。 (一)糖尿病酮症酸中毒 由于糖利用减少,分解脂肪产生酮体增加而引起酮症。未控 制或治疗不当的糖尿病出现笋中毒或昏迷时,尿酮体检查极有价值。 应与低血糖、心脑疾病酸中毒或高血糖渗透性糖尿病昏迷相区别。酮 症酸中毒时尿酮体阳性,而后者尿酮体一般不增高。但应注意糖尿病 酮症者肾功能严重损伤而肾阈值增高时,尿酮体亦可减少,甚至完全 消失。 (二)非糖尿病性酮症 如感染性疾病(肺决、伤寒、败血症、结核等发热期),严重

呕吐、腹泻,长期饥饿、禁食,全身麻醉后等,均可出现酮症,这些 情况相当常见。妇女孕期因妊娠反应呕吐、进食少,体脂降解代谢明 显增多,发生酮症而致酮尿。 (三)中毒 如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等 (四)服用双胍类降糖药 服用降糖灵时,由于药物有抑制细胞呼吸的作用,可出现血糖正 常、尿酮体阳性的现象

第六节 尿胆红素、尿胆原检查 胆红素是血红蛋白分解代谢的中间产物,是胆汁中的主要成 分,其代谢产物有尿(粪)胆原等。当各种原因造成胆红素产生过多, 或肝细胞摄取、结合及排泄等过程发生障碍时,均可导致血、尿、粪 便中胆红素及其代谢产物(尿胆原等)的改变。对这些物质进行检验, 可协助临床诊断。 一、千化学法测定的原理 尿胆红素试剂带的主要组成见表 3—19。其测定原理,是在 强酸介质中直接胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应生成红色的复 合物(图 3—12);其反应过程,是重氮盐作用胆红素中央使其裂开, 再结合形 2 分子的偶氮胆红素而呈现颜色变化。

尿胆原测定原理:根据干化学试剂带组成的不同,其测定方法有 所差异。试剂带的组成及其特性见。美国 Ames 公司采用,在强酸条 件下尿胆原和对—二甲氨基苯甲醛发生醛化反应, 生成樱红色缩靶图 3—13);德国宝灵曼公司采用,在强酸条件下尿胆原和对—甲氧基苯 重氮四氟化硼发生重氮盐偶生成胭脂红色化合物。

二、千化学法测定的注意事项 (1)标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素,尿 胆原氧化成尿胆素。 (2)尿液中含高浓度维生素 C 和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应, 使尿胆红素呈假阴性; 当患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸 苯偶氮吡啶的代谢产物时,可呈假阴性。 (3)尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等,可 使尿胆原检查结果出现假阳性,一些药物(如吩噻嗪)也可产生颜色, 干扰实验。 (4)正常人尿胆原排出量每天波动很大,夜间和上午量少,午 后则迅速增加, 在午后 2~4 时达最高峰; 同时尿胆原清除率与尿 pH, 相关,pH5.0 时,清除率为 2ml/min,pH8.0 时,增加至 25m1/ min。因此有学者提倡预先给患者服用碳酸氢钠碱化尿液,收集午后 2—4 时(2h 排出量)进行测定,以提高检出率。 (5)对于阻塞性黄疸尿胆原减少的病人,不能使用干化学法进 行测定,因为大多数尿液试剂带都没有设制检测尿胆原阴性这一项。

三、尿胆红素、尿胆原检查的临床意义 胆色素(bilepigments)是指血红素的一系列代谢产物,包括胆 红素、胆绿素、胆素原族和胆素族化合物。胆素原族和胆素族化合物 种类较多,命名交叉重复,临床上常简化为:凡是粪便中的胆素原族 化合物统称为粪胆原;其氧化产物胆素族化合物统称为粪胆素;存在 于尿液中的同类化合物,则相应地称为尿胆原和尿胆素。 胆红素是血红蛋白的代谢产物,衰老红细胞破坏后释放出的 血红蛋白经分解产生的胆红素约占胆红素总量的 80%,其余 20%来 自其他血红素蛋白,包括肌红蛋白、过氧化物酶、过氧化氢酶及大多 数细胞色素等的分解代谢。 正常成人每天形成 250~300mg 的胆红素。 胆红素在肝;脾及骨髓的网状内皮细胞中产生。这些细胞将 衰老的红细胞破坏,释出血红蛋白,血素与其结合的珠蛋白分开。在 微粒体血红素加氧酶系催化下,血红素原卟啉Ⅸ环上的。次甲基桥从 碳膈子的两侧断裂,从而产生相等克分子的 CO、铁及胆绿素Ⅸ。 。这 一步骤是需氧反应,并需有 NADPH 的参刃。胆绿素进一步在可溶性 的胆绿素还原酶(其辅酶亦为 NADPH)的催化下,迅速被还原为胆绿 素,老者很快被还原为胆红素。 在生理 pH 条件下,胆红素是难溶于水的脂溶性物质。在网 状内皮细胞内生成的胆红素进入血液乏。即与血浆清蛋白或。球蛋白 (以清蛋白为主)结合成复合体。这种结合又限制了胆红素自由透过各 种主物膜, 使其对组织细胞不致发生毒性作用。 正常人每 100ml 血浆

中的血浆蛋白能与 20—25mg 胆红蓑豸合,而正常人血浆胆红素浓度 只不过 1~10mg 儿,所以正常情况下不致有大量游离胆红素进入组 豢而产生毒性作用。 咀红素在血中以胆红素一清蛋白的形式运输,但因其尚未经 过肝细胞转化结合,故称为未结合胆红嚣或游离胆红素。此种胆红素 随血液循环至肝脏,很快就被肝细胞摄取。一旦胆红素进入肝细胞, 就与缰胞中的胆红素结合蛋白质结合,于是不再返回越出细胞膜,从 而促使胆红素不断向肝细胞内透入。 进歼细胞内的胆红素主要与葡萄 糖醛酸结合,生成葡萄糖醛酸胆红素酯(在肝内主要是 1 分子胆红素 结兰:分子葡萄糖醛酸,形成双葡萄糖醛酸胆红素),也有少部分与 硫酸根、甲基、乙酰基、甘氨酸或葡萄糖磺萋等相结合。此种胆红素 也称为结合胆红素。 结合胆红素自肝细胞释放至毛细胆管,成为胆汁的一种特殊 组成成分。胆红素随胆汁排出肠道,自画插末端起在肠道细菌作用下 进行水解和还原反应, 脱去了葡萄糖醛酸和加氢成无色的胆素原族化 合橱.包括中胆素原、粪胆素原及尿胆素原等。所形成的胆素原族化 合物基本上随粪便排出(正常成人每天入粪便中排出胆素原族化合物 约 40~280mg),约有 10%一 20%可被肠粘膜重吸收,再经门静脉转 入肝鳖。构成胆素原的肠肝循环,仅有极少部分胆素原进入体循环而 由尿排出(正常成人每日从尿中排出尿跹原约 0.5~4.0mg)。

进入血液的胆素原族约 80%与血浆蛋白质结合,仅有一小部

分可以通过肾小球滤出。在肾近曲小管中可被重吸收一部分,在远曲 小管中又可排出一部分。尿中胆素原族的排出量与下列因素有关。 1.尿液 pH 酸性尿中胆素原族趋于不解离状态,具脂溶性,易被肾小管重 吸收,故排出量减少;反之,在碱性尿中胆素原族趋于解离状态,水 溶性,不易被肾小管重吸收,故排出量增多。 2.胆红素的形成量 当胆红素的来源增加,如患溶血性黄疸时,随胆汁排出的胆 红素增加,在肠道形成的胆素原族也增多,故重吸收并进入体循环而 自尿中排出的胆素原族的量也增多;而当胆红素形成减少,如再生障 碍性贫血时,尿中胆素原族的排出量减少。 3.肝细胞功能 由于胆素原族的肠肝循环中逸入体循环的量直接取决于肝脏 清除胆素原族的功能,因此尿中胆素原排出量增多,可较敏感地反映 肝细胞损伤。临床经验表明,在病毒性肝炎早期未出现黄疸之前往往 已可发现尿中胆素原族增多。 4,胆道梗阻 ’

患梗阻性黄疸时,胆红素不能顺利排入肠腔,胆素原族形成 减少,尿中胆素原族的量也相应减少;在胆道完全梗阻时,尿中胆素 原族完全消失。 正常人血浆中胆红素的总量不超过 10mg 几,其中未结合胆 红素占 4/5。胆红素代谢异常而致体内积蓄,遂成黄疸,其特征为

血浆中胆红素水平升高,皮肤、巩膜及粘膜黄染。黄疽大致分成三大 类。 (1)肝前性黄疸 或称溶血性黄疸,系败血症、蚕豆病、疟疾、 异型输血等使红细胞大量破坏,血红蛋白释出过多所致。 (2)肝原性黄疸 或称肝细胞性黄疸, 是指在感染(如病毒性肝 炎)、中毒及肝硬化等肝病时,由于肝细胞内或肝内毛细胆管广泛性 病变,使肝细胞对胆红素摄取、结合、转运及排泄障碍所致。 (3)肝后性黄疸 或称梗阻性黄疸,由于结石、肿瘤或先天性 胆道闭锁等原因造成总胆管梗阻所致。 (2)肝原性黄疸 或称肝细胞性黄疸, 是指在感染(如病毒性肝炎)、 中毒及肝硬化等肝病时,由于肝细胞内或肝内毛细胆管广泛性病变, 使肝细胞对胆红素摄取、结合、转运及排泄障碍所致。

第七节 尿亚硝酸盐测定 干化学试剂带法检验尿液亚硝酸盐是尿液自动化分析仪设置 的多项检测之一, 主要用于尿路感染的快速过筛试验, 方法简便易行, 得到广泛应用。 一、干化学法测定的原理 干化学试剂带法测定尿亚硝酸盐试剂带膜块中,主要含有氨

基磺胺(或氨基苯砷酸)和 1,2,3,4—四氢并喹啉—3 酚(或 N—萘基 乙二胺)物质(表 3—22),而大多数尿路感染是由大肠埃希氏菌引起, 正常人尿液中含有来自食物或蛋白质正常代谢产物的硝酸盐。 当尿液中有大肠埃希氏菌增加时,可将硝酸盐还原为亚硝酸 盐,其可将膜块中的氨基磺胺(或氨基苯砷酸)重氮化而成重氮盐,后 者与 1,2,3,4—四氢并喹啉—‘3 酚(或 N—萘基乙二胺)偶联,使 膜块产生图 3—16、图 3—17),借以诊断患者是否被肠杆菌科细菌感 染。其检出敏感度为 0.3~0.6mg/L。

二、实验注意事项 (一)尿路感染的病原微生物种类 尿亚硝酸盐检查先决条件是尿液中的致病菌必须含有硝酸盐 还原酶。 从尿路感染患者尿液分离出巧病原微生物有: 大肠假单胞菌、 变形假单胞菌、 克雷伯氏杆菌、 粪链球菌、 葡萄球菌、 绿脓假单胞菌、 厌氧菌(如消化球菌、消化链球菌、韦荣氏球菌、拟杆菌)、酵母菌(如 白色念珠菌、圆球拟酵母菌)、支原体刃人型支原体、酵母支原体)等。 急性尿路感染单纯由大肠杆菌引起者占 85%,而慢性肾炎由大肠杆 菌引起者占 52%,有些则是大肠杆菌与其他细菌(如葡萄球菌、肠球 菌)的混合感染。肠菌科的大肠杆菌、虱大肠杆菌、变形杆菌、产气 杆菌÷绿脓杆菌及部分厌氧菌皆含硝酸盐还原酶, 可使尿亚硝酸盐测 定呈阳兰反应。而粪链球菌因缺乏此酶可出现阴性反应。用妇女阴道 及宫颈部分离出的多种真菌进行了还原适酸盐实验研究, 结果表明短

密青霉菌还原硝酸盐阳性率很高,约为 72.73%,五峰霉菌为 67, 65%,酵母及假丝酵母属真菌还原阳性率低。白曲霉、土曲霉、黄柄 曲霉、屡地青霉、产紫青霉及砖红酵母还原阳吃率很高。尿路感染的 病原微生物种类见表 3—23。 (二)体内适量硝酸盐的存在 尿液中需有适量硝酸盐,一是来源于食物中的硝酸盐,如加工肉 制品及某些地区饮水也是硝酸盐的来源, 二是来源于体内蛋白质正常 代谢产物的硝酸盐;三是体内可由氨内源性合成硝酸盐。尿硝酸盐排 泄增加不是因体内硝酸盐分解代谢降低, 而是加速硝酸盐的生物合成 所致。体内缺乏硝酸盐,尽管有细菌也将出现假阴性结果。 (三)尿液标本留取的时间 尿液应在膀胱停留间隔 4h 以上,使细菌有充分的作用时间, 故以早晨留取第一次尿液为宜。 间隔时间过短, 试验易呈假阴性反应。 留取尿液样杯应清洁,并应尽快检测,否则易出现假阳性。 (四)药物的影响 使用利尿剂可使尿中硝酸盐含量不高,本试验呈假阴性;硝 基呋喃可能降低亚硝酸盐反应的灵敏性;非那吡啶可引起假阳性;使 用抗生素细菌被抑制时,可出现假阴性;使用大量维生素 C(250mg /L 或以上)时,可出现假阴性结果等。 高比重尿可使本试验敏感性降低; 若尿液中含亚硝酸盐离子≤lmg 儿,可出现假阴性。

三、尿亚硝酸盐测定的临床意义 (1)参考范围,尿亚硝酸盐定性试验,一般为阴性。 (2)尿亚硝酸盐阳性常见于大肠埃希氏菌引起的泌尿系感染, 其检出敏感度为 0.3~0.6mg/L。同时符合以下三个条件:①感染 的细菌含有硝酸盐还原酶;②食物中含有适量的硝酸盐;⑧尿液标本 在膀胱停留间隔 4h 以上,并除外药物等干扰因素。此实验诊断大肠 埃希氏菌感染的符合率为 80%,反之呈阴性结果。因此,本实验阴 性并不能排除菌尿的可能;同样,亚硝酸盐阳性也不能完全肯定泌尿 系统感染,标本放置过久或污染可呈假阳性,应结合其他尿液检查结 果综合分析,得出正确的判断。 (3)文献报告,单一测定亚硝酸盐诊断尿路感染的敏感性比干化 学检查白细胞≥25/Pl 低, 而比白细胞≥100/Pl 高; 按白细胞≥100 /P1 诊断尿路感染的特异性,比亚硝酸盐阳性及白细胞≥25/P1 要 高;同时用干化学法测定亚硝酸盐及白细胞时,亚硝酸盐阳性+白细 胞≥25~1 组合方式诊断尿路感染,比亚硝酸盐阳性+白细胞≥100/ 山诊断尿路感染可靠性大。用亚硝酸盐+白细胞组合,敏感性和特异 性分别为 89.8%和 92.o%,阴性预测值 98.6%,说明阳性不能 肯定为菌尿,但阴性基本可除外菌尿。检出革兰氏阴性杆菌尿优于革 兰氏阳性菌尿。当白细胞≤25/弘 1 时,亚硝酸盐反应阴性,灵敏度 83.5%,阴性预测值 97.0%。当白细胞≥500/P1 时,亚硝酸盐反 应阳性,灵敏度 40%,阳性预测值为 100%。在联合应用亚硝酸盐+ 白细胞测定 5218 份尿液,对 10‘/m1 的菌尿敏感性为 79.2%,特

异性为 81,0%。 (4)亚硝酸盐+干化学白细胞检查+显微镜检查的组合,灵敏度 和阴性预测值 100%,此时的亚硝酸盐特异性和阳性预测值 100%。 (5)亚硝酸盐+干化学白细胞检查+尿培养用于诊断产科病人 的尿路感染, 尿培养阳性证实亚硝酸盐和白细胞的敏感性分别为 43% 和 77%,特异性为 99%和 96%,两个试验组合的敏感性和特异性为 92%和 95%。 (6)亚硝酸盐+干化学白细胞检查+蛋白质试剂带检测新生儿 和婴儿尿路感染,阳性预测值很低,阴性预测值为 99.4%,男、女 性别之间无差异。由此认为,试剂带有助于婴儿尿路感染的诊断;可 避免进行昂贵的培养。 综上所述,亚硝酸盐可作为尿路感染的过筛试验。但由于亚 硝酸盐单一试验影响因素较多, 如将亚硝酸盐十干化学白细胞检查组 合观察,必要时用未离心尿标本直接涂片进行革兰氏染色油镜检查, 可大大提高尿路感染诊断的可靠性。

第八节 尿白细胞、红细胞测定 近年来,干化学尿液自动化分析逐步在国内普及,但不少操 作者由于对干化学缺乏严格的过筛标准旬质量控制措施, 往往造成实 验误差,甚至延误疾病的诊断。目前较为突出的是,只看干化学检查

的白细抱、红细胞结果,而忽视显微镜检查的倾向。由于干化学法检 查与显微镜检查是两种不同的实验方法,很雄找出完全对应的关系, 本节着重讨论检验工作中常见的一些问题。 一、千化学法测定的原理 尿红细胞测定试剂带膜块中的主要特性见表 3—24。其测试原 理是: 尿液中的血红蛋白或其破坏释敦的游离血红蛋白均含有亚铁血 红素,后者具有过氧化氢酶样活性,可使过氧化物分解释放出新生态 氧能使无色的邻甲联苯胺(或四甲替联苯胺)变成蓝色的邻甲联苯胺 (或四甲替联苯胺)物质(见图 3—18)。 尿白细胞试剂带测定膜块中的主要成分(表 3—25)是吲哚酚酯、 重氮盐两种,其测定原理基于粒细胞胞浆内含有酯酶,此酶可作用于 膜块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,后者与重氮盐反应形成紫色缩 合物(图 3—19),其颜色深浅与细胞的多少呈比例关系。 .

二、干化学法检查注意事项 (一)试剂带的批间差异 试剂带不同而引起同 1 份标本测定结果的差异。 (二)标本对结果的影响 尿液标本必须新鲜,留尿后尽量立即测定,以免红、白细胞破 坏,导致干化学法与镜检法的人为实验误差。干化学法既可测定完整 的细胞成分,又能测定因细胞破坏胞浆内涵物来辨别细胞的有无(通 过特异或非特异性酯酶检测白细胞, 通过血红蛋白的过氧化物酶样反

应检测红细胞),因此报告时要了解临床诊断,综合分析,排除相互 结果的干扰。某些肾病患者的终尿,由于各种原因使细胞裂解,可导 致仪器壬与目测法的差异。 笔者认为, 此类标本最好不使用干化学法。 (三)干扰物对红、白细胞测定的影响 1.对白细胞试验的干扰 干化学法检查尿内白细胞的原理,是基于粒细胞浆内含有酯酶, 可作用于试剂带膜块中的吲哚酚酯,操作时应注意:①应了解此法只 能测定粒细胞,不与淋巴细胞反应,在肾移植病人发生排异反应尿中 二淋巴细胞为主时, 会出现阴性结果, 此类病人不应用干化学法检验, 应该以显微镜检查法为准。②尿液污染甲醛,或高浓度胆红素,或使 用某些药物(如呋喃咀啶)时,可产生假阳性;尿蛋白>5g/L,或尿液 含有大剂量先锋 IV、庆大霉素等药物时,可使结果偏低或出现假阴 性。 2.对红细胞试验的干扰 尿液中含有对热不稳定酶、肌红蛋白或菌尿,可引起干化学 法测定尿红细胞的假阳性; 易使检测红纽胞出现假阳性的原因主要是 热不稳定过氧化物酶的干扰。笔者对 690 例尿液进行了分析,其中 113 例化学阳性,镜检阴性,进一步用金标法抗 Hb 单克隆抗体检查 也为阴性;但将尿液加热煮沸后再进行一化学检查,结果为阴性,说 明假阳性是由于存在不耐热的过氧化物酶所致。 尿液中大量维生素 C 的存苎,可竞争性抑制反应致使干化学法产生假阴性,应予警惕。为 了探讨何种方式用药可对试验有干扰,笔舌使用了前述的方法(见第

四节),发现静脉滴注维生素 C5h 后才能达到不影响尿红细胞测定的 水平。百此静脉滴注后,原则上在 5h 内不要留尿液标本进行检测; 不同厂家的仪器和试剂带对维生素 C 的影碉程度也不同(表 3—26)。 仪器—1 的试剂带中含有破坏维生素 C 的酶, 尿内维生素 C 浓度高达 1 000mg 时,也不干扰红细胞的检测;仪器—2、仪器—3 及配套试剂 带则较差,维生素 C 浓度分别在 200mg/L 和 omg/L 时即有干扰。 为了避免这个问题,目前国外有多种抵抗维生素 C 干扰的试剂带, 或使用可同时检测维生素 C 的试剂带,在检测尿液病理成分的同时 监测尿维生素 C 的浓度。 (四)细胞破坏造成的“假阴性”现象 所述“假阳性”“假阴性”现象,是以显微镜检查为基础的。 、 由于干化学法是检测细胞胞浆内涵物来 Q 别细胞的有无(通过特异或 非特异性酯酶检测白细胞, 通过血红蛋白的过氧化物酶样反应检测红 细墅, ,在实际工作中可能存在下列问题:①由于尿液在膀胱贮存时 间过长或标本放置时间延长,导致白细眶破坏,酯酶释放到尿液中, 造成干化学法阳性、镜检阴性的所谓“假阳性”现象。②肾病患者的 红细胞在肾蛀或泌尿道破坏,或尿比重过低、尿 pH 偏高,均易造成 红细胞破坏,血红蛋白放出并出现尿中,造成‘谓红细胞干化学检查 的 “假阳性” 现象。 因此在干化学法结果与显微镜下所见出现矛盾时, 要结合临床综合分析,甚至要动态观察,切不可一概否定干化学法结 果。 (五)镜检法与干化学法的相应关系

有作者报道了干化学与镜检两种方法检查尿红细胞实验结果的 对应关系,发现这两种方法虽然结 Q 没有明显的对应关系,但每一 等级尿分析仪结果对应镜检红细胞计数有较好的百分比范围, 特别是 干《学“neg”档,<3/HP 占 100%,红细胞≤10///1,镜检正 常占 99.82%,3~5/HP 占 0.18%。鉴于此种现象.笔者认为在 排除上述病理或其他干扰因素存在下, 仪器结果为 “红细胞≤10/Pl” 时,可以省略显微镜喧查,而其他档次(25~l、50/P1、150~1 和 250/P1)均有较大的交叉,必须镜检。 由于尿液分析仪白细胞检测与显微镜下计数实验原理截然不 同,报告方式是两种不同的概念,很难找出两者的对应关系,迄今还 没有一种直接的换算方式。 屡有文献报道了计算板计数与仪器结果的 内在联系,Alwall 报道每高倍视野白细胞数大约是仪器法报告(白细 胞数/FAl)数的 11%; Loosyt 等指出, 白细胞/Pl 是白细胞/高倍视 野的 10.8 倍,笔者的实验结果是 8,7 倍,因此仪器法白细胞检查 只是一个筛选实验,决不可代替显微镜检查。 三、千化学过筛的标准 所谓过筛,就是在仪器、试剂带质量合格,检验人员相对稳定 的条件下制定一个标准,达到此标准可视为尿沉渣成分在正常范围 内,免除进一步显微镜检查。一般认为,镜检结果白细胞数在 o~5 /HP、红细胞数在 0~3/HP 和透明管型在 0~1/LP 的范围内,为 尿沉渣参考范围。如果一个标本经过两种方法 检查,干化学结果符合过筛标准,镜检结果在正常范围,说明过筛是

正确的。干化学结果不符合过筛标准,镜检结果也异常,说明过筛是 正确的。干化学结果异常,镜检结果正常,视为假阳性;反之干化学 结果正常, 镜检结果异常, 视为假阴性。 由于过筛的目的是筛出正常、 镜检病理性标本, 因此过筛的原则是不能出现假阴性, 否则就耍漏诊。 干化学结果假阳性的标本经过镜检后即可得到纠正。 虽假阳性不如假 阴性那么重要, 但假阳性结果过多, 镜检量过多, 达不到过筛的目的。 为了探讨过筛标准,笔者利用双盲法同时对 6349 例尿液标本 采用干化学法(宝灵曼公司生产的 MiditronR 型尿液分析仪和配套试 剂带)和显微镜检查方法进行对比分析。结果显示:如果以干化学检 查结果白细胞阴性、红细胞≤10//11、亚硝酸盐阴性及尿蛋白阴性 四项指标联合作为过筛镜检的标准,白细胞检查假阴性率仅为 0, 80%,红细胞检查假阴性率仅为 0.13%,在 360 份有各类管型的尿 液中, 只有 29 例含有透明管型为。 1/LP(在参考范围内)的尿液标 一 本漏检,证明以此作为过筛标准是可行的。为了证实其他尿液分析仪 筛选时也可应用这个标准,笔者使用德国宝灵曼公司生产的 MiditronR 型 , 美 国 Ames 公 司 生 产 的 ClinitekR 200 型 , 德 国 BehringwerkeAG 公司生产的 Urimac 三种尿液分析型及相应配套的试 剂带,同时进行了 1 000 例干化学法与显微镜镜检的相关分析,结果 显示此标准也同样适用于上述两种尿液分析仪(Clinitek“200 型、 Urimac 型)。 四、千化学过筛适用范围的局限性 ·— (1)肾科及泌尿系科病人的尿液不适合于干化学过筛显微镜检

查。 (2)以镜检结果作为诊断依据(如结石、结晶和肿瘤细胞)或观察疗 效时,不宜使用干化学方法作为过筛。 -

(3)由于干化学分析干扰因素较多且不可避免的有一定的假阴性 率,因此要结合临床表现判断结果,决不可只看干化学分析,忽视镜 检。 (4)尿液的外观(特别是颜色、浊度)与尿沉渣有一定的相关关系。 当尿液外观异常时,应注意显微镜检查。 .

(5)干化学试剂带的质量、稳定性及质量控制与过筛的准确 性密切相关。仪器及干化学试剂带一定要符合要求。仪器的正常运转 和质量合格试剂带是实验结果的基本保证。 笔者制定上述标准使用的 是宝灵曼公司的 Miditronu 型尿液分析仪及 Combur~‘Test’M 配套 试剂带。每个实验室使用过筛标准时,首先必须做对照观察(所用干 化学试剂带与显微镜对比),确认仪器试剂带的敏感性与特异性是否 符合过筛标准的要求,如不符合,应制定相应的标准或更换试剂带, 以达到过筛的要求,切不可不顾具体情况硬行引用过筛标准。 ――――――――――――――――――――――――――― ―――――――

第九节 尿液湿化学法检查 尿液常规干化学检查虽然简单、快速,但许多因素都直接影响

尿液自动化分析的准确性, 以及干化学分析某些实验本身存在一定的 缺陷,只起初筛作用,在必要时候尿液常规检查仍以湿化学为诊断依 本节将介绍尿液化学成分各种湿化学的检查方法及注意事项。 一、尿蛋白质检查 正常人尿液中蛋白质含量极少, 一旦尿蛋白含量>100mg 凡, 蛋 白质定性试验便呈阳性反应而称勺蛋白尿(proteinuria)。 检验蛋白尿的 重要性就在于:蛋白尿主要反映肾小球损害,以及肾小球滤过率 F 增 加。目前用于尿蛋白定性和定量的方法较多,尿蛋白定性法常用的有 加热乙酸法、磺基水杨酸法;尿董白定量法常用的有化学比色法(双 缩脲法)、染料结合法(考马斯亮蓝法)。 (一)定性试验 1.加热乙酸法 原理,加热乙酸法是利用加热煮沸使蛋白质变性凝固,再加乙酸使尿 液 pH 下降达蛋白质的等电三(pH4.7),而有利于已变性蛋白质的沉 淀,同时可消除尿液中某些磷酸盐加热析出所致的混浊。 (试剂)5%乙酸溶液。 (操作) (1)取 15mmXl50mm 试管 1 支, 加入清晰尿液至管的 2/3 高度。 手持试管下端,将试管上部斜置三火焰上加热,煮沸即止。 (2)轻轻直立试管,在黑色背景下观察煮沸部分有无混浊。 (3)滴入 5%乙酸溶液 3—4 滴,再煮沸,立即观察结果,如无混浊 出现,试验为阴性,如有混浊或絮状块,为阳性。

(结果判断)按表 3—27 判定结果。 注意事项)加热乙酸法较敏感,干扰因素少。本法对尿蛋白的敏感 性是 150mg/L,但在使用时必丽注意 3 点。 (1)尿液加热后出现浑浊,可能是蛋白质,亦可能是磷酸盐, 故一定要加酸后再煮沸,盐类的浑浊即岿夫;而蛋白质的浑浊则不消 失。 (2)尿蛋白含量很少时,加酸后才出现混浊。因此,操作必须 遵照加热、加酸、再加热的程序。加入的鬃酸量也要适当,过多或过 少均可使阳性反应程度减弱,因为强碱(pH≥9.0)或强酸(pH<3,0) 时,都远离蛋白质的等电点出现假阴性结果。表 3—8 显示不同 pH 对尿蛋白测定结果的影响。 (3)在无机盐存在的条件下,白蛋白和球蛋白才能凝固沉淀, 无盐或低盐饮食的病人因尿内电解质等量少可致假阴性。 试验时可先 加饱和氯化钠溶液 1~2 滴于尿液中,再进行操作。 2.磺基水杨酸法 (原理)磺基水杨酸又称磺柳酸,为生物碱剂,在略低于蛋白等 电点的酸性环境下, 磺基水杨酸的酸嘎碉离子与带正电荷的蛋白质结 合成不溶性蛋白盐而沉淀(图 3-20)。


相关文章:
尿干化学检测
尿11项检测干化学测定的... 34页 免费 浅析尿干化学检测中的常... 暂无评价...尿液干化学检测操作规程 8页 2下载券 尿干化学检测原理 暂无评价 1页 免费 尿...
尿液干化学分析原理及影响因素
各品牌的尿分析仪及其配 套试纸虽略有差异,项目代码也略有不同,但检测原理...2. 干化学测定酮体时对乙酰乙酸的敏感度约是丙酮的 7~10 倍,因此,与其他...
尿干化学分析课程
(2)检测原理 (3)检测参数 (4)临床应用 (5)质量...①用于初诊患者及健康体检使用的 8~11 项筛检组合...使用干化学尿比密测定时,变化范围为 pH6.2~ 7....
尿液干化学检查中常见影响因素的分析
目前,尿隐血检查是一种 非特异性的检测方法,上述酶类物质在尿隐血的干化学测定中,可不同 程度地使试纸膜块上的过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出游离氧, ...
尿液干化学分析仪检测参数、临床意义及注意事项
11.维生素 C 采用还原法。维生素 C 具有 1,2-烯...测定结果的基础上增加 0.005, 作为由于碱性尿损失...①尿糖测定方法学的差异:干化学尿糖检测原理是基于葡...
尿液干化学检测操作规程
(=)测定方法以及体系 干化学试带法:包括尿液分析仪,分析仪试剂带;尿的干化学试带可检测 的项目有蛋白质、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、比重...
干化学尿液分析仪
干化学尿液分析仪 尿液分析仪是测定尿中某些化学成分...仪器的原理 断因此要求操作者对自动化仪器的原理、...病人及健康检查使用的 8-11 项筛选 项筛选组合尿...
尿干化学原理
尿11项检测干化学测定的原... 34页 免费 尿干化学试纸条测试原理、... 9页...2012 年二季度检验科业务学习 尿干化学检测原理及干扰因素干扰因素 检测项目 酸碱...
尿液干化学分析仪
微处理系统结合参考系统 将电信号校正为测定值,以...表 5-10 检测项目 反应原理 各模块反应的原理、...2.器材 尿液干化学分析仪、尿干化学试带。 操作...
尿液干化学分析原理及其临床意义
各品牌的尿分 析仪及其配套试纸虽略有差异,项目代码也略有不同,但检测原理...2. 干化学测定酮体时对乙酰乙酸的敏感度约是丙酮的 7~10 倍,因此,与其 ...
更多相关标签:
尿干化学检测原理 | 卡尔费休水分测定原理 | 化学需氧量的测定 | 化学耗氧量cod测定仪 | 化学需氧量测定仪 | 水分测定仪原理 | 全自动化学发光测定仪 | 卡氏水分测定仪原理 |