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试卷-生物技术制药修改


生物制药学
2009年试 卷

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1.真核细胞mRNA的3末端含有(A) A.polyA B. polyC C. polyG D. polyU

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2.凝胶过滤层析所依据的原理(A) A.分子大小 B.分子形态 C.带点状态 D.解离状态

? 3.与细菌相比,采用动物细胞作为宿主细胞 来生产药品(C) A.培养条件要求大致相同,产量低,但有较 完善的翻译后修饰 B. 培养条件要求大致相同,产量高,但翻译 后修饰不完善 C. 培养条件要求高,产量低,但有较完善的 翻译后修饰 D. 培养条件要求高,产量高,且有较完善的 翻译后修饰

被用构建工程细胞的动物细胞有
? CHO细胞(中国仓鼠卵巢的建株纤维母细胞 ) ? CHO-dhfr细胞(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞株)

? CHO-K1细胞(中国仓鼠卵巢细胞 )
? COS细胞(非洲绿猴肾成纤维细胞并经SV40病毒基因转化的细胞系 ) ? BHK-21细胞(幼仓鼠肾细胞株) ? MDCK细胞(犬肾细胞 ) ? MRC-5细胞(人胚肺成纤维细胞 ) ? Namalwa细胞(人淋巴瘤细胞株) ? Vero细胞(非洲绿猴肾细胞株) ? WI-38细胞(人胚肺二倍体成纤维细胞 ) ? SP2/0细胞(小鼠骨髓瘤细胞株) ? Sf-9细胞(昆虫细胞系)

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4.CHO细胞来源于(C)
A.小鼠 B.大鼠 C.中国仓鼠 D.非洲绿猴

? 5.培养的动物细胞增殖到一定程度时需要传 代,其中(D)P84 ? A.异倍体细胞不能传代 ? B.异倍体细胞只能传代10-20代 ? C. 异倍体细胞只能传代40-50代 ? D.异倍体细胞可无限制地传代

? 6.就培养的植物细胞而言,其次级代谢产物 的积累主要在(D) ? A.延迟期 ? B.加速器 ? C.对数期 ? D.稳定期

? 7.目前工业上应用的酶的生产方法大多是 (C) ? A.动物细胞提取 ? B.植物细胞提取 ? C.微生物发酵 ? D.化学合成

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8.对酶活性影响的固定化方法是(D) A.物理吸附法 B.离子结合法 C.共价结合法 D.选择性热变性法

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9.固定化细胞的优点(D) A.增加细胞生长速率 B.增加细胞密度 C.增加酶的活性 D.保持酶的原始状态

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10.有机相酶反应的优点(B) A.酶的活性增加 B.可抑制有水参与的副反应 C.反应条件易于控制 D.适合于多酶反应

? 11.在微生物发酵生产中最好的速效碳源是 (A) ? A.葡萄糖 ? B.果糖 ? C.蔗糖 ? D.麦芽糖

? 12.在发酵工业生产中采用最早且至今应用 最广的生物反应器是(B) ? A.气升式反应器 ? B.搅拌釜式反应器 ? C.鼓泡式反应器 ? D.转鼓式反应器

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13.抗生素的生产多数采用(C) A.从天然植物中提取的方法 B.植物细胞培养的方法 C.微生物发酵的方法 D.化学合成的方法

? 14.植物细胞两相培养的基本出发点是(D)
? ? ? ? A.在细胞内创造一个初级代谢产物的贮存单元 B.在细胞内创造一个次级代谢产物的贮存单元 C.在细胞外创造一个初级代谢产物的贮存单元 D.在细胞外创造一个次级代谢产物的贮存单元

? 15.在植物细胞培养中使用最多的碳源是 (C) ? A.蛋白质 ? B.核酸 ? C.糖类 ? D.脂类

? 16.抗体的最小识别单位为一个CDR,其相 对分子量为(A) ? A. ﹤2000 ? B. 5000-10000 ? C. 15000-20000 ? D. ﹥20000

? 17.双链抗体是分子量最小的双功能抗体, 其大小为IgG的(C) ? A. 1/10 ? B. 1/5 ? C. 1/3 ? D. 1/2

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18.抗体的发展阶段大致可以分为(C) A.从单克隆到单克隆到基因工程抗体 B.从单克隆到基因工程到多克隆抗体 C.从多克隆到单克隆到基因工程抗体 D.从多克隆到到基因工程单克隆抗体

? 19.来源于真核生物的药物蛋白,其基 因在原核的大肠杆菌中(D)
? A.只能以融合蛋白和非融合蛋白的形式表达 ? B.只能以融合蛋白和分泌蛋白的形式表达 ? C.只能以非融合蛋白和分泌蛋白的形式表 达 ? D.既能以融合蛋白和非融合蛋白也能以分 泌蛋白形式表达

? 20.生产基因工程药物时,对生物材料的质 量控制是(D)
? A. 需要严格检查目的基因和宿主细胞,对表达载 体可以不做检查 ? B.需要严格检查目的基因和表达载体,对宿主细 胞可以不做检查 ? C.需要严格检查表达载体和宿主细胞,对目的基 因可以不做检查 ? D. 对目的基因、宿主细胞和表达载体都需要严格 检查

二多项选择题(每小题2分,共10分)
? 21.将冻存于液氮罐中的动物细胞复苏时需 要注意的事项是(ABD) ? A.总要求是快融 ? B.可置于37℃加速融化 ? C.冻存管不能用乙醇消毒 ? D.二甲基亚砜应尽早去除或稀释 ? E.融化后立即用于后续实验

? 22. 如果要将某一中药材的体细胞培养成完 整植株,需要具备的条件有(ADE) ? A. 离体状态 ? B. 克隆相应的基因 ? C. 导入外源基因 ? D. 一定的营养物质和激素 ? E. 具有完整细胞核的细胞

? 23.单链抗体是由一段弹性连接肽把抗体可 变区重链和轻链相连而成,其优点有 (ABCE) ? A.由于是单链,易于进行分子改造 ? B.体内半衰期短,免疫原性低 ? C.分子小,容易进入组织,因而可用于肿 瘤的诊断和治疗 ? D.亲和力高,因而稳定性高 ? E.可在原核系统中表达,易于进行基因工程 操作和大批量生产

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24.按照模拟酶的属性可将其分为(ABCDE) A.主-客体酶 B.胶束酶 C.肽酶 D.半合成酶 E.印迹酶

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25.发酵的基本过程包括(ABCD) A.种子制备 B.发酵 C.发酵液预处理 D.提取精制 E.化学修饰

三、填空题(每小题2分,共10分)
? 26. 促红细胞生成素是第一个被发现并被批 准应用于临床的造血生长因子,其英文缩 写是 EPO ,它是一种 酸性 糖蛋白 。 ? 27.植物细胞的后含物常存在于 细胞质 和 液泡 中 ? 28.噬菌体抗体库技术的特点主要有: 模拟 天然全套抗体库 、可获得高亲和力的人源 化抗体、开了人工免疫和杂交瘤技术。

? 29.抗体酶是抗体的 高度选择性 和酶的 高 效催化能力 巧妙结合的产物,本质上是一 类具有催化活力的免疫球蛋白。 ? 30.发酵产物的提取一般有吸附 、沉淀 、 溶剂萃取和离子交换等方法。

四、名词解释题(每小题3分,共15分)
? 31.蛋白质工程 ? 是在基因工程基础上综合蛋白质化学、蛋 白质晶体学、计算机学辅助设计等知识和 技术发展起来的研究新领域,开创了按人 类意愿设计和研制人类需要的蛋白质的新 时期,被称为第二代基因工程。P1

? 32. 生物转化 ? 也称生物催化,是指利用生物离体培养细 胞或器官及细胞器等对外源化合物进行结 构修饰而获得有价值产物的生理生化反应。 P209

? 33.基因工程疫苗 ? 使用DNA重组生物技术,把天然的或人工 合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或 哺乳动物细胞中,使之充分表达,经纯化 后而制得的疫苗。应用基因工程技术能制 出不含感染性物质的亚单位疫苗、稳定的 减毒疫苗及能预防多种疾病的多价疫苗。

? 34.核酶 ? 是具有生物催化功能的RNA,是生物催化 剂。核酶又称核酸类酶、酶RNA、核酸类 酶RNA。它的发现打破了酶是蛋白质的传 统说法。

? 35.分批发酵 ? 营养物和菌种一次加人进行培养,直到结 束放出,与外部没有物料交换的培养方式。 在这一过程中,除了氧气、消泡剂及控制 pH的酸或碱外,不再加入任何其它物质。

五、解答题(每小题5分,共25分)
? ? ? ? ? ? ? 36. 简述基因工程菌的培养方式 基因工程菌的培养方式P36 (1) 分批培养 (2)补料分批培养: (3)连续培养 (4)透析培养 (5)固定化培养

? 37.常用于植物细胞大规模培养的生 物反应器有哪些?
植物细胞大规模培养的生物反应器P201 ? (1)机械搅拌式生物反应器;(2)鼓泡塔生 物反应器;(3)气升式生物反应器;(4)转 鼓式生物反应器;(5)固定化细胞生物反应 器:

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38.简述单克隆抗体的制备流程 (1)抗原与动物免疫 (2)细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养 (3)筛选阳性克隆与克隆化 (4)杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定 (5)单克隆抗体的大量制备 (6)单克隆抗体的纯化

? 39.与天然酶相比固定化酶有哪些优点? 具有生物催化剂的功能,又有固相催化剂的功能。 ① 可多次使用,在多数情况下,酶的稳定性提高 ② 反应后,酶、底物、产物易分开,产物中无残留酶, 易纯化,产品质量高。

优 点

③ 反应条件易控制,可实现转化反应的连续化和自动控制。
④ 酶的利用效率高。单位酶催化的底物量增加,用酶量减

少。
⑤ 比水溶性酶更适合于多酶反应。

? 40.简述在菌种选育中常用的几类化学诱变剂与 DNA的作用形式。 ? 三类化学诱变剂与DNA的作用形式 ? ① 与一个或多个核酸碱基发生反应,使DNA复制 时使碱基配对的转换而导致变异。如烷化剂,如 硫酸二乙酯(DES)、甲基磺酸乙酯( EMS)、 亚硝基胍(NTG)、氮芥(NM)等 ? ②碱基的类似物,掺入到DNA中引起变异。如5溴尿嘧啶(5BU)是胸腺嘧啶(T) 的类似物 ? ③ DNA分子上减少或增加一两个碱基引起碱基突 变点以下全部遗传密码转录和翻译的错误。吖啶 类物质

六、论述题(每小题10分,共20分)
? 41.基因表达常用的宿主细胞有哪些?试比 较它们的优缺点。

宿主细胞常用两大类: 原核细胞:常用有大肠杆菌、枯草 芽胞杆菌、链霉菌等;

真核细胞:常用有酵母、丝状真菌、
哺乳动物细胞等。

大肠杆菌
优点:生长快速、代谢简单、遗传体系清楚、容易操
作、细胞破碎容易。

缺点: ① 不存在导向内质网的信号序列,分泌能力
不足,产品多为胞内产物,提取困难; ②蛋白表达后

不能修饰加工(糖基化等); ③产物蛋白质N端多余
一个蛋氨酸残基,能引起免疫反应; ④内毒素存留。

⑵枯草芽胞杆菌:
分泌能力强,蛋白质不形成包含体。产物蛋 白质不能糖基化。有很强的胞外蛋白酶对产 物降解。

⑶链霉菌:
作为外源性基因表达受到重视。不致病、使 用安全、分泌能力强、表达产物可糖基化。

? ⑴ 酵母
① 繁殖迅速,可廉价的大规模培养, 而且没有毒性,基因工程操作与原核生物 相似。 ②表达产物直接分泌到细胞外,简化 了分离纯化工艺。 ③表达产物能糖基化。 ④特别是某些在细菌系统中表达不良 的真核基因,在酵母中表达良好。 目前以酿酒酵母应用最多。干扰素和 乙肝表面抗原已获成功。

⑵丝状真菌

优点:分泌能力强,能正确进行翻译后加工 (肽剪切、糖基化)有成熟的发酵和后处理工艺。 ⑶哺乳动物细胞

优点:表达产物可由重组转化细胞分泌到培养 液中,纯化容易。产物是糖基化的接近天然物。
缺点:生长慢,生产率低,培养条件苛刻,费 用高,培养液浓度稀。

六、论述题(10分)
? 42.谈谈你对生物技术安全性的认识


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